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培養(yǎng)基實驗技巧,您知道多少?

  • 發(fā)布日期:2018-11-19      瀏覽次數(shù):1922
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          一、添加劑的添加
          1.溫度的掌握:卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。
          2.定量:過多會抑制一些目標菌,太少又導致雜菌的過度生長。

          二、培養(yǎng)溫度的掌握
          1.真菌類:25-28℃培養(yǎng)
          2.細菌類:李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。
          3.其他一般在36℃左右

          三、接種方法
         
      常用的方法主要有劃線、三點接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

          四、革蘭氏染色方法
         
      染色時間的掌握、沖洗的方法

          五、劃線獲得單個菌落的方法,劃不出單個菌落的原因
          1.平板上有過多的水分;
          2.劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復灼燒。
          3.多區(qū)劃線,三區(qū)或四區(qū)劃線。

          六、涂布和傾注的區(qū)別
          1.涂布利于觀察,但由于涂布棒上會帶有少量的菌液,影響計數(shù)的準確性。
          2.涂布更為準確,但不利于觀察菌落的狀態(tài)。

          七、培養(yǎng)基配制時應(yīng)注意的問題
          1.滅菌溫度要嚴格控制,按照要求滅菌,尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高,過高會導致糖分焦化,影響質(zhì)量。
          2.瓊脂培養(yǎng)基不能反復溶化。反復溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。
          3.培養(yǎng)基不能反復滅菌,反復滅菌也會導致營養(yǎng)成分的破壞。
          4.含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后,要搖勻。

          八、板的保存
          大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

          九、產(chǎn)品的保存
          1.干粉培養(yǎng)基:避光干燥,結(jié)塊后不能使用。
          2.亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等:冷凍保存,使用時,要常溫解凍,避免水浴加熱。
          3.抗生素類:冷藏保存,溫度過高會導致靈敏度的下降。
          4.兔血漿:冷藏保存少量的紅色不會影響結(jié)果。

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