人胰島素試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

人胰島素試劑盒操作步驟：　　
1．從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗(yàn)所需板條，未用的板條和干燥劑請(qǐng)放回鋁箔袋內(nèi)壓 實(shí)自封條，密封口袋，放回4℃。　　
2．空白孔加標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本稀釋液，其余相應(yīng)孔中加標(biāo)本或不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品（100ul/孔），用封板膠紙封住反應(yīng)孔，36℃孵箱孵育90分鐘。　　
3．提前20分鐘準(zhǔn)備生物素化抗體工作液。　　
4．洗板5次。　　
5．空白孔加生物素化抗體稀釋液，其余孔加入生物素化抗體工作液（100ul/孔）。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔，36℃孵箱孵育60分鐘。　　
6．提前20分鐘準(zhǔn)備酶結(jié)合物工作液。避光室溫（22-25 ） ℃ 放置。　　
7．洗板5次。　　
8．空白孔加酶結(jié)合物稀釋液，其余孔加入酶結(jié)合物工作液（100ul/孔）。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔，36℃孵箱，避光孵育30分鐘。　　
9．打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。　　
10．洗板5次。　　
11．加入顯色底物（TMB）100ul/孔，避光36℃孵箱，避光孵育15分鐘。　　
12．加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測(cè)量OD450值（3分鐘內(nèi)）。在儀器保存讀數(shù)結(jié)果并打印一份紙質(zhì)結(jié)果。　　
13．實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結(jié)束。　　建議保存酶標(biāo)板框，以備下次或者今后試驗(yàn)使用。　
人胰島素試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備工作：　　
1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，以平衡至室溫。　　
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋（1:20）。未用完的放回4℃。　　
3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本稀釋液0.5ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中，靜置15分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻（濃度為1000 pg/ml）。然后根據(jù)需要進(jìn)行稀釋。（建議標(biāo)準(zhǔn)曲線使用以下濃度： 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml）。復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品原液（1000 pg/ml）若未用完請(qǐng)分裝后放入-20℃以下電冰箱內(nèi)保存，保存兩個(gè)月。已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品請(qǐng)廢棄。　　
4. 生物素化抗體工作液：按當(dāng)次試驗(yàn)所需要得用量，使用前20分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體（1:30）成工作濃度。當(dāng)日使用。若實(shí)驗(yàn)次數(shù)過(guò)多導(dǎo)致生物素化 抗體量不足，可向我們公司單獨(dú)購(gòu)買生物素化抗體。（須提供抗體批號(hào)）　　
5. 酶結(jié)合物工作液：按當(dāng)次試驗(yàn)所需要得用量，使用前20分鐘，以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃 縮酶結(jié)合物（1:30） 成工作濃度。當(dāng)日使用。若實(shí)驗(yàn)次數(shù)過(guò)多導(dǎo)致濃縮酶結(jié)合物量不足， 可向我們公司單獨(dú)購(gòu)買濃縮酶結(jié)合物。（須提供酶結(jié)合物批號(hào)）　　
洗滌方法：　　
1. 自動(dòng)洗板機(jī)：要求注入的洗滌液為350ul，注入與吸出間隔15－30秒。洗板5次。　　
2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350ul，靜置30秒后甩盡液體，在厚迭吸水紙上拍干。洗板5次。