ELISA實(shí)驗(yàn)做復(fù)孔有必要嗎

本周一上午，中南大學(xué)劉老師送樣我司代測(cè)人IL-24的ELISA實(shí)驗(yàn)。劉老師所送樣本量較少（18個(gè)樣本），訂購(gòu)了我司試劑盒的zui小規(guī)格就是48T（48T可以檢測(cè)37個(gè)樣本，11孔做標(biāo)準(zhǔn)空白對(duì)照孔），收到劉老師樣本后我司銷(xiāo)售專(zhuān)員建議老師實(shí)驗(yàn)可以做個(gè)復(fù)孔，這樣的實(shí)驗(yàn)報(bào)告結(jié)果會(huì)更加。

劉老師聽(tīng)取了我司銷(xiāo)售專(zhuān)員的建議，在設(shè)計(jì)ELISA復(fù)孔檢查時(shí)，提出問(wèn)題：是對(duì)同一個(gè)樣品作兩次稀釋?zhuān)俜謩e加到板上的兩個(gè)孔，還是只稀釋一次，然后吸取兩次分別加到兩個(gè)孔？

我司技術(shù)答復(fù)：

在實(shí)驗(yàn)室階段，可能需要多次稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尨螖?shù)的分別做復(fù)孔，以便檢查稀釋過(guò)程中帶來(lái)的誤差；如果同一次稀釋的復(fù)孔一致的存在檢測(cè)差異大，可能ELISA板的均一性存在一定問(wèn)題（排除操作因素）。如果不同稀釋次數(shù)差異大，說(shuō)明稀釋方法有問(wèn)題。在ELISA實(shí)驗(yàn)中設(shè)復(fù)孔，目的是為了減少本次實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)誤差對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)帶來(lái)的影響，有條件的話(huà)復(fù)孔的數(shù)量可以增加，系統(tǒng)誤差更小。